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低温电子显微镜服务

低温电子显微镜(cryo-em)是结构生物学中的一种前沿技术,使科学家能够直观地观察生物大分子的精确细节。冷冻电磁基于近原子分辨率的透射电子显微镜。在众多生物医学领域,如药物开发、抗体、疫苗等领域,市场需求不断增长。

冷冻电显效应相较于X射线晶体学的优势

 

尽管X射线衍射仍能达到略高的分辨率,冷冻电磁具有显著优势:

  • 所需的样本量极少。
  • 不需要结晶。
  • 不需要同步加速器来做X射线。
  • 保护近似本土状态。
  • 对灵活性的评估。
  • 适用于难以结晶的颗粒,如膜蛋白或超分子组装体(如病毒)。
  • 构象的异质性可以在单个标本中解决。
  • 接受低纯度。

 

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结构解决方案

  • 样品适宜性评估——负面污渍

在投入重要显微镜资源进入冷冻电子显微镜之前,负染色检测通常在室温低压下进行。这一步可利用高电子密度染色剂评估样品适宜性,包括均匀性、聚集性、颗粒形态、大小和分布。

负染色是评估样品是否适合下游冷冻电磁数据采集的关键质量控制步骤。

  • 高分辨率结构测定——单粒子分析(SPA)

低温电磁数据采集通常生成约10⁴到10⁶个不同方向捕获粒子的二维投影。这些投影通过图像处理流程进行计算对齐和分类,以重建亚纳米级或近原子级分辨率的三维密度图。

随后,在重建后的密度图中构建、完善并验证原子模型,为目标生物大分子的功能机制提供结构洞见。

  • 原位结构分析——低温电子断层扫描(Cryo-ET)

冷冻电子断层扫描使生物结构在其原生细胞或病毒环境中实现三维可视化成为可能。该方法特别适合研究大型大分子组装体、膜相关复合物及病毒感染机制,提供单颗粒方法无法访问的空间和组织信息。

服务工作流程

项目咨询→NDA签署→服务协议确认→样本接收→质量检查→阴性染色筛查→冷冻电子显微镜数据收集→数据处理→报告交付。

 

数据与成果交付

在整个项目生命周期内,提供完整的数据可用性。交付的材料包括带增益参考文件的原始低温电子显微成像影片、数据处理各阶段的中间数据文件、带有分辨率和质量指标的最终三维密度图、适用的原子坐标模型,以及如MolProbity评估在内的交叉验证报告。

所有数据都可以通过便携式存储设备或安全的云平台传输。

三大主要装备

我们的冷冻电子显磁服务依靠配备先进仪器的高端科学研究平台的支持。

可用系统包括 塔洛斯 L120C G2,入门级透射电子显微镜和低温电磁筛查平台; 冰川2,一套200千伏的低温电磁系统,优化用于常规单粒子和断层扫描工作流程;以及 泰坦克里奥斯 G4,一款旗舰级300千伏低温电磁平台,旨在实现最大稳定性、自动化、吞吐量和分辨率潜力。

这些平台共同支持低温网格筛选、单颗粒分析、低温电子断层扫描以及结构生物学广泛应用中的先进方法开发。

为什么选择Longlight?

我们通过使用高端科学研究平台,与行业专家和学术科学顾问合作,提供宝贵且成熟的冷冻电子显微镜经验。我们的服务强调数据交付的完全透明和完整性,涵盖原始数据、中间处理文件、最终密度图、原子模型和验证报告。

通过结合先进仪器、经验丰富的数据处理流程和均衡的交付时间表,我们提供可靠、高质量的低温电子显微结构解决方案,满足多样化的研究需求。

常见问题解答。

问1:客户需要准备多少样品?

  • 负染色:

最低浓度 ~1 g/L

最小体积 ~100 微升。

 

  • 含可溶性蛋白的SPA:

最低浓度 ~1 g/L

最小体积 ~100μL。

 

  • SPA与膜蛋白:

最低浓度 ~1 g/L

最小体积 ~100μL。

如有需要,待讨论和调整

 

问2:样品缓冲液的要求是什么?

  • pH值范围:6.0-8.5
  • 盐浓度<200 mM
  • 低甘油(多少?doi:10.1107/S2053230X24002553)
  • 低叠氮化物(含多少?缺少支持参考)

 

问3:典型的服务流程是什么?

项目咨询→NDA签署→服务协议确认、样品接收→质量检查→阴性污渍→数据收集→数据处理→报告交付→确认。

 

问4:平均送货时间是多少?

  • 阴性染色:1-2周。
  • SPA,初步结果:6-8周。
  • SPA,高分辨率模型:2-3个月。

ChIP-测序

ChIP 研究 DNA 和蛋白质之间的相互作用,ChIP-seq 与下一代测序相结合,以检测基因组中与特定转录因子/组蛋白结合的 DNA 位点,用于研究蛋白质和染色质之间的相互作用。

基因组学

朗辉一直专注于分子诊断和分子生物学,我们推出了一些NGS相关仪器和试剂耗材,主要是Focused Ultrasonicator,一直致力于推动基因组学的发展,更好地服务于人类医疗事业。

耗材和套件

Longlight 提供不同类型的预制琼脂糖凝胶、核酸清除剂、Qubit 管、核酸提取试剂盒和文库制备试剂盒。同时,这些产品均可广泛应用于基础科学研究、生物制药等应用场景。

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