为什么CAR-T产品质量控制必须使用核酸清除剂
2026-06-26先进细胞疗法制造中的关键保障
癌症治疗领域的一项重大进展是嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法的引入。像其他“活体药物”一样，CAR-T产品的质量和安全需要严格的测试。然而，在CAR-T生产设施易受的众多威胁中，有些未被发现，其中最关键的是环境核酸污染。本文讨论了核酸清除剂在CAR-T产品质量控制中必要性的理由。
[CAR-T细胞微塑料聚集的鉴定与分析 - ScienceDirect]
看不见的威胁：CAR-T制造中的环境污染物
CAR-T细胞的生产是一个复杂的多步骤过程，包括收集患者血液、分离患者T细胞、病毒转导到患者T细胞、患者T细胞的扩增，以及T细胞的最终制剂。在每个步骤中，这些步骤可能需要数周完成，CAR-T细胞产品完全容易受到环境污染物的影响。
虽然有一些监管要求，但主要关注其他一些生物污染物：
• FDA要求对CAR-T细胞产品进行不育、内毒素和支原体检测。
• 向量拷贝数（VCN）需控制至每个单元最多1–5份副本。
•纯度要求规定了一定比例的CAR表达CD3细胞。
与这些其他检测要求相比，DNA和RNA的环境污染受到更多关注。暴露RNA和DNA等有害环境物质会降低安全性和产品质量。
最新研究：CAR-T产品中的微塑料（2024年）
Mahati S等人在《危险物质杂志》上的一项研究讨论了基于CAR-T细胞的疗法含有问题量的微塑料。
这项研究还引发了其他结论，比如：
1. 目前尚未讨论微塑料与CAR-T细胞制造相关的讨论。
2. 根据流式细胞术、ELISA和细胞毒性研究，微塑料几乎不会导致CAR-T细胞活性。
3. 微塑料导致了细胞凋亡、铁剥落和T细胞的耗尽。
4. mTOR信号通路被过度激活。
研究概述了以下临床后果：
1. 暴露于微塑料的CAR-T细胞在识别和破坏癌细胞方面能力较差。
2. 微塑料引起的T细胞耗尽，降低了患者中CAR-T细胞的潜在抵抗力。
这种微塑料污染程度可能导致治疗无效。
这一研究方向聚焦于微塑料的影响，以及微塑料和环境核酸在制造业中污染的发现是密不可分的，并且都存在于同一独立的制造和消耗环境中。
国际监管框架：污染GMP标准
PIC/S及全球监管机构已对CAR-T制造中的污染问题提出了明确预期。
以下是2026年质量管理文献中引用的内容：
• CAR-T产品不能进行终端灭菌或过滤灭菌。因此，防止污染是唯一剩下的防线。
• 污染控制策略（CCS）必须包括人员、设备/组件、设施环境、材料、工艺以及检测/预防。
• 在核酸污染控制中，特别需要注意：
• 环境监测项目检测核酸残留的能力。
• 设立专门生产区，防止不同患者产品的交叉污染。
• 清洁程序必须经过验证，以证明去除DNA/RNA污染。
• 监管缺口：现行法规规定“消毒”和“清洁验证”，但几乎没有要求证明核酸的去除。因此，制造商仍面临交叉污染和核酸假阳性检测的风险。
环境核酸污染影响CAR-T质量控制
环境DNA和RNA片段带来了两个主要问题：
1. 质量控制测试结果错误
质粒DNA或病毒载体可能残留在表面并污染质量控制样品。由于环境核酸和产物核酸在质量控制测试中无法区分，qPCR和天然神经质谱（NGS）会引发安全隐患，导致产品批次不必要的拒收和患者治疗延误。
2. 产品间交叉污染
患者的CAR-T产物中的核酸可能残留在用于生产CAR-T的设备表面，并转移到另一位患者的CAR-T产物中。鉴于这对自体治疗来说存在风险，这是不可接受的。
3. 效力质量控制测试受影响
对CAR-T产品的效力测试需要测量CAR表达水平和CAR-T细胞的功能活性。环境中存在的核酸可能会干扰通过转染过程测量CAR-T细胞功能活性的效力检测。这导致对产品效力的评估可能低于或高于实际水平。
介绍核酸清道夫
传统使用的清洁剂如乙醇或稀释漂白剂不会破坏核酸。核酸清粪器技术对DNA和RNA的化学降解填补了这一空白。
1. 作用机制
• 通过快速化学水解分解>99%的表面附着RNA/DNA
• 组分不会与用于核酸提取的硅膜或磁珠相互作用
• 不会对提取效率或分离核酸质量产生不利影响
• 验证后续病毒核酸检测结果的真实性和可靠性
2. CAR-T制造的优势
• 多功能：可应用于实验台面、生物安全柜、塑料、泡沫，甚至盒装和纸盒包装
• 便利：无需调整浓度，均匀喷涂一层于表面
• 安全：无需特殊防护措施，标准手套、口罩和护目镜即可
• 简单：无需特殊的储存和搬运控制措施
Longlight Technology——您在细胞治疗制造中的可靠合作伙伴
Longlight Technology 是一家值得信赖的生物技术和实验室解决方案供应商，成立于2015年，由一支拥有丰富生物技术市场经验的大学教授和技术专业人士团队创立。
公司专业能力：
• 首创中国聚焦超声取样系统和全球首个流体真空脱气系统
• 自成立以来一直专注于分子诊断和分子生物学
• 世界一流的研究与设计生物实验室设备
相关CAR-T质量控制产品组合：
• 预制琼脂糖凝胶、量子比特管、核酸提取及文库制备套件
• 核酸纯化磁性分离器，均匀场设计
质量与可靠性：
• 室温储存下一年稳定性
• 经验证可用于工作台、塑料薄膜、纸盒和泡沫盒
• 仅供研究和实验用途。临床诊断不适用
• 全球布局：朗莱特参加了在泰国曼谷举办的Medlab Asia & Asia Health 2024，旨在服务全球生物医学界。
核酸清除剂在CAR-T制造中的集成
CAR-T生产现场的期待：
- 每日净化：
• 每次操作前后生物安全柜内的每个表面
• 设备表面（离心机、孵化器、磁性分离器等）
• 运输中间品和最终产品的集装箱
2.In 进行多项操作时，需要进行去污：
• 用于接触不同患者产品的设备处理表面
• 存储设备的表面（冰箱、冷冻柜、集装箱等）
3. 质量控制实验室：
• 用于PCR和测序准备的表面
• 核酸提取工作区的去污
4. 验证：
• 在涂抹核酸清除剂前后，进行表面拭子
• >99%的核酸去除将通过qPCR确认
• 结果将为后续检查做好准备
结论：现代细胞疗法制造基础
CAR-T疗法的快速发展已导致到2024年已有12种全球批准的疗法。随着基于患者的治疗逐渐发展为现成疗法，污染问题将更加明显。
这将更合理，原因包括：
• 环境中的核酸威胁最终产品的安全性和质量
• 监管机构正在提高污染控制标准
• Mahati等人2024年关于微塑料的研究，强调环境污染物如何损害CAR-T功能
• 核酸清除器为该特定风险提供了经过验证且易于使用的解决方案
对于CAR-T制造商来说，在污染控制策略中实施核酸清除剂代表了对产品质量、合规性以及最终患者预后方面的积极投资。随着行业向更复杂的基因编辑细胞疗法发展，基本原则未变：清洁的制造环境生产安全有效的疗法。
号召性
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常见问题
问题1。核酸清除剂对生物安全柜玻璃表面安全吗？
当然。它对玻璃、不锈钢、塑料和涂层表面是安全的。只需轻轻喷雾，然后自然风干即可。
问题2。残基会对CAR-T细胞的存活能力产生什么影响？
完全没有影响。该试剂无细胞毒性，不抑制细胞培养。
问题3。那么，它是否消除了我们日常使用中去除乙醇和漂白剂的需求？
不。它应仅用于去除核酸，不应替代细菌和病毒的消毒剂。
问题4。在CAR-T GMP设施中，我应该多久使用一次？
每批工作台的前后，以及患者批次间共用设备的拍摄。
问题5。喷完后我需要擦拭吗？
不是必须的。让溶液自然干燥可以最大化降解。擦拭可能会扩散未降解的核酸。
