如何将核酸电泳时间缩短至10分钟？

核酸电泳通常比需要的要慢——在繁忙的实验室中浪费时间、使凝胶过热和延迟决策。

痛苦：为什么凝胶需要太长时间

大多数球队接受 30 到 60 分钟的跑步是“正常”的。但从长远来看，实际成本却隐藏着。热量积聚，条带模糊，您会在 PCR 和下一步之间失去时间。经典的TAE/TBE缓冲液不是为在较高场强下的速度而设计的。推动电压，凝胶变暖;推得更久，你可能会面临迁移扭曲或恢复不良的风险。重新运行凝胶以修复涂抹成本超过几分钟——它会降低信心并堵塞您的工作流程。

从与客户的对话中，我们一次又一次地听到相同的痛点。研究人员希望更快地检查 PCR 产物、不会停滞的高通量筛选以及可以直接进行连接或凝胶回收的清洁条带。采购需要经久耐用且不需要经常更换的耗材。在朗光科技，我们提出了一个简单的问题：如果核酸电泳可以在 5 – 10 分钟内可靠地完成，而不会牺牲下游性能，会怎样？

❓ 实验室告诉我们什么？

过热、铸造和运行之间的缓冲强度不一致以及对下游台阶的焦虑限制了速度。团队对更换缓冲液犹豫不决，因为他们担心连接、提取产量或 RNA 稳定性。您不必在速度和质量之间做出选择。

(无花果回复 1. 在0.8%琼脂糖凝胶上应用超快运行缓冲液。车道 1：D12000

分子量标准（5μL）;泳道 2：4 μL;泳道 3：3 μL;泳道 4：2 μL;泳道 5：1 μL)

(数字 2.超快运行缓冲液的应用

1% 琼脂糖凝胶。泳道 1：D5000 分子量标准品 （5 μL）;泳道 2：4 μL;泳道 3：3 μL;泳道 4：2 μL;泳道 5：1 μL)

（图 3.超快运行缓冲液的应用

2% 琼脂糖凝胶。泳道 1：D1000 分子量标准品 （5 μL）;泳道 2：4 μL;泳道 3：3 μL;泳道 4：2 μL;泳道 5：1 μL。

• 超快运行缓冲液与各种浓度的琼脂糖凝胶（0.8%、1%、2%）完全兼容，如图所示 1–3.无论凝胶浓度如何，核酸条带都能保持出色的分辨率和清晰度，确保分离不同大小 DNA 分子的实验需求。

修复：超快速运行缓冲区解释

我们 50x 超快速运行缓冲液 是一种专为琼脂糖核酸电泳而构建的低离子强度配方。离子负荷越少意味着给定场的热量越少。将其与正确的琼脂糖浓度配对，您可以在高达 25 – 30 V/cm 的电压下自信地作，将通常需要 30 分钟的运行压缩为仅 5 – 10 分钟。在头对头使用中，团队的分离速度通常比标准 1 倍 TAE 或 1 倍 TBE 快 ~2.5 – 3 倍。

这个怎么运作

较低的离子强度可降低焦耳热，并有助于在较高电压下保持尖锐的能带。这种热稳定性保持了 DNA 和 RNA 的分辨率，同时提高了速度。同样重要的是，该化学成分对下游友好：它不会干扰 DNA 凝胶提取或连接，因此您可以直接进行克隆、纯化或定量。

• 快速周转：在 25 – 30 V/cm 下运行 5 – 10 分钟

• 锐利的波段：即使在高场强下也能实现高分辨率

• 下游兼容性：不影响凝胶回收或连接

• 更高的回收率：经常超过 TAE/TBE 回收性能

• 可重复使用的缓冲容量：强大的缓冲功能，可多次使用

• 快速设置

将缓冲液以 1：50 稀释以制备 1x 工作溶液（例如，将 20 mL 的 50x 溶液溶入 980 mL 蒸馏水中）。将 1x 在室温下储存。为获得最佳稠度，请使用同一批次的 1x 浇铸和运行凝胶;混合不同批次会改变凝胶界面处的缓冲液强度。不要稀释到 1 倍以下——这会导致异常迁移。

作条件

以 25 – 30 V/cm 的凝胶长度运行，并根据您的储罐几何形状和热行为进行调整。与任何高场运行一样，请确认您的电源限制;如果电流或电压下降，请检查仪器是否限制了电流或功率。染色是灵活的：在凝胶中添加染料或在运行后染色 - 两者都有效。

• 安全稳定

连续运行或高环境温度会提高缓冲液温度。如果需要，冷却设备或将其放在冰上以保护分辨率。定期更换缓冲液以保持准确性。在室温下储存 50x 储备液和 1x 工作溶液;在推荐条件下，稳定性至少为收到后 12 个月。与往常一样，穿实验室外套和一次性手套。本产品供专业人士研究使用。

现实世界的收益以及如何开始

当速度可靠时，下游的一切都会得到改善。5 – 10 分钟的凝胶可让您检查 PCR、调整文库制备或验证连接，而不会破坏一天的时间。对于高通量组，更快的凝胶可以疏通队列并提高通量。这意味着午餐前有更多的数据，而晚上的重播更少。

在 Longlight Technology，我们构建了这个缓冲区，以帮助团队缩短假设和结果之间的循环。在试点部署中，实验室报告说，与传统缓冲液相比，在较高区域的条带更干净，连接到连接的切换更顺畅，凝胶提取产量更高。可重复使用性和浓缩的 50 倍格式也支持成本控制：一瓶就可以大有帮助，强大的缓冲容量意味着运行过程中的交换次数更少。

快速核酸电泳的最佳实践

• 使用相同的 1x 批次铸造和运行以保持一致性。

• 从 25 V/cm 开始，然后根据您的设置向 30 V/cm 移动。

• 在较长的运行序列中观察缓冲液温度;根据需要冷却。

• 如果将 TAE/TBE 浇注凝胶滴入快速缓冲液中，则将电压保持在 200 V 以下;在这种情况下，非常高的电压会扭曲结果。

• 它的闪耀点

验证运行时间短，克隆过程中的快速检查，筛选数十个 PCR 扩增子，并加快通常在传统系统下爬行的 RNA 工作流程。如果您的团队花在等待凝胶上的时间多于对结果采取行动的时间，那么收益是立竿见影的。

国际泳联的思考

准备好将核酸电泳时间缩短至 10 分钟，而无需牺牲透明度或恢复率？立即与 Longlight Technology 联系，索取样品、获取 SOP 模板或查看凝胶盒的兼容性。让我们将凝胶运行从瓶颈转变为快速检查点，让您的实验继续进行。